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无外泌体血清灭活工艺流程

发布时间:2021-01-26 点击量:357
   外泌体特指直径在30-100nm的盘状囊泡,其内部包裹了多种蛋白质、mRNA、non-coding RNA等分子。外泌体主要来源于细胞内多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。无外泌体血由细胞分泌释放后,通过个种体液在体内传播,被靶细胞摄入后,释放内部的生物分子,参与细胞间的通讯,调节细胞功能。
  就目前而言几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体,不同的生物体液(血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、腹水)中都发现有大量外泌体存在,外泌体由细胞分泌释放后,通过个种体液在体内传播,被靶细胞摄入后,释放内部的生物分子,参与细胞间的通讯,调节细胞功能。
  无外泌体血清灭活工艺流程:
  1.选用与血清瓶同规格的对照瓶一个
  2.对照瓶内放入与血清等体积的水
  3.温度预试:对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃。
  4.无外泌体血清灭活血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,定时30分钟。
  5.大瓶无外泌体血清灭活后,进行分装
  6.保存:分装后,无外泌体血清抽样做无菌试验,-20~-70℃保存。
  无外泌体血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的无外泌体血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。