影响培养基灭菌效果的因素有哪些?
1、营养物质的维持。
当微生物在湿热灭菌中被杀死时,培养基的营养成分也受到一定程度的破坏,尤其是氨基酸和维生素。比如在121℃下仅20分钟,59%的赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸被破坏,还有相当数量的蛋氨酸和色氨酸也被破坏。在热量的作用下,一些营养物质可能会因热量而相互反应,导致培养基中原有的营养物质发生变化,从而影响培养基的质量。
2.微生物的耐热性。
细菌孢子热阻大,灭菌所需时间取决于将细菌孢子减少到规定数量所需的时间。
3.pH值。
pH值对微生物的耐热性影响很大。当pH值在6.0-8.0之间时,微生物死亡的可能性最小。pH<6.0时,微生物容易死亡。此时H+很容易渗入微生物细胞,从而改变细胞的生理反应,促进细胞死亡。因此,培养基的酸碱度越低,所需的时间越短。
4.培养基的组成。
由油、糖和蛋白质组成的高浓度有机物会在细胞周围形成一层薄膜,影响热传导。然而,盐和色素的高浓度削弱了其耐热性,使杀菌更容易。例如,大肠杆菌在水中加热到60-65℃时死亡,在10%糖溶液中70℃加热4-6分钟,在30%糖溶液中加热30分钟。一般在含糖量高的时候,11111111选择115°C30分钟;一般培养基可在121℃下选择20分钟。
5.泡沫。
泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死杂菌。
6.颗粒。
小颗粒容易杀菌,大颗粒难杀菌。含有少量较大颗粒和粗纤维的介质可以通过粗过滤去除(这不应影响介质的质量)。培养基的结块会导致培养基灭菌不*。
8.灭菌锅内的空气是否排出。
这是影响杀菌的关键点,也就是温度和压力的比例关系。同样的压力下,如果空气没有排出,也就是说不是纯蒸汽灭菌,此时的温度可能达不到目的要求,会严重影响灭菌效果。