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无血清冻存液的厂家为您讲解细胞冻存步骤和复苏步骤

发布时间:2021-07-27 点击量:78
   无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(肿瘤细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80℃长期保存(>5 年)。该冻存液含 DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。
  细胞冻存步骤:
  1、 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
  2、 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
  3、 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5 分钟离心收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。
  4、 加入适量的Cell Freezing Medium 细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为 5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
  5、 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管 1ml 或 1.5ml。
  6、 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
  7、 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
  冻存细胞复苏步骤:
  从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解冻。
  待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合,加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
  镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。
        以上仅供参考,希望对您有所帮助哦!