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胎牛血清,血清成分有几大类?

发布时间:2020-12-21 点击量:360
  胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质zui高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。
 

南美胎牛血清

  做细胞培养的都知道血清对于细胞生长是十分重要的,其大部分成分已为人所知,但仍有一小部分特殊成分扔不清楚。血清成分有下面几大类:
  1.蛋白质类
  包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;
  2.多肽类
  主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;
  3.激素类
  激素对细胞的作用是多方面的。包括:
  胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;
  类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:
  促生长激素:促进细胞增殖的效应;
  CAS#: 50-23-7:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中的CAS#: 50-23-7,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。
  4.其他成分
  如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。
  胎牛血清注意事项:
  1. 血清解冻与存放:-20℃取出后建议放入2~8℃冰箱中解冻约,每隔一段时间轻轻摇晃均匀,不可直接放入温度较高处解冻,避免因温度改变太大,造成蛋白质凝集而出现沉淀,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,建议无菌分装,再放回冷冻,避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。
  2. 血清是否灭活:加热可灭活血清中补体系统,在极少数情况下(培养ES细胞,平滑肌细胞时)建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭活血清。血清灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。
  3.无血清培养基:无血清培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,血清仍然是培养液中基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。