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缓冲液的配制方法和保存方法介绍

发布时间:2020-12-24 点击量:304
   PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline),一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用较为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二价阳离子。
  缓冲液配制方法:
  含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
  称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。
  PBS:Phosphate Buffered Saline
  PBS 1L配方pH7.4:
  磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g,
  磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.44g,
  氯化钠(NaCl):8g,
  氯化钾(KCl):0.2g,
  加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,后定容到1L
  保存方法:
  加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,后定容到1L。高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。
  PBS缓冲液(pH7.2~7.4):
  KH2PO42mM
  Na2HPO4 8mM
  NaCl 136mM
  KCL 2.6mM
  PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。
  1x PBS缓冲液就是0.01M的磷酸盐缓冲液,可直接使用。2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.1M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。