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无外泌体血清制备步骤

发布时间:2021-04-25 点击量:10
   以外泌体为代表的细胞外囊泡是近几年研究的热点,目前的外泌体研究主要通过研究体外培养细胞来源的外泌体,分析其在体内外的功能作用。一般的血清FBS中含有供体细胞自然分泌的大量Exosomes,而用于Exosome研究的细胞必须提前更换无外泌体的血清进行培养,以减少对后续实验结果的污染。
  目前市面上存在着商业化的无外泌体血清,然而由于其价格较高等因素,很多研究者选择自己制备无外泌体血清,而常用的主要是基于超速离心的无外泌体血清分离方法
  无外泌体血清制备步骤:
  1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。
  2. 在超净工作台,将普通血清置于超离管中,配平后,进行热封口。
  3. 将封口后的超离管放于离心机转子中,并加入相应适配器然后拧紧转头盖。
  4. 设置离心程序:4℃,120,000 ×g,离心18小时(也有研究者选择100,000 ×g离心18小时【2】)。
  5. 离心结束后,回收上清液,为避免污染,在超净工作台操作。
  6. 收集得到无外泌体血清,并储存于-20℃中备用。
  无外泌体血清产品特点:
  1、专为外泌体研究而设计;
  2、无菌采集的健康胎牛血清过滤法去除外泌体;
  3、胎牛血清内源外泌体去除率达97%;
  4、过滤法可有效保护FBS中重要的细胞营养因子;
  5、培养的细胞生长速率与形态与普通FBS无差异。
  通过上述文章我们对无外泌体血清有了详细的了解了,希望可以帮助到大家,对于无外泌体血清的相关知识大家可以继续关注网站进行了解,要是有需要无外泌体血清的朋友们可以随时联系我们,会24小时为大家服务.