当前位置:网站首页技术文章 > PBS缓冲液配制方法
产品中心products

PBS缓冲液配制方法

发布时间:2022-03-29 点击量:95
   PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供双价阳离子(注:PBS不是磷酸缓冲液:phosphate buffer solution,PB)。pbs缓冲液应高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。
  PBS缓冲液由水、氯化钠、弱酸KH2PO4和共轭碱Na2HPO4配制而成,通常将pH调至pH7.4。人体的pH值介于7.35至7.45之间,平均值为7.40。此外,PBS缓冲液还模拟了人体渗透压和离子浓度。由于它对细胞无毒,因此被广泛用于洗涤细胞、组织运输和稀释。尤其在动物细胞培养实验中,常用于胰酶消化细胞前的细胞洗涤,彻底去除血清。
    PBS缓冲液的作用不仅仅如此,仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。
  当然,磷酸缓冲液也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比磷酸缓冲液还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。
  配制方法
  含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
  称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),(KCl),吐温-20 ,加水。
  PBS:Phosphate Buffered Saline
  PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
  磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
  (NaCl):8g,
  KCl)0.2g,
  加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,zui后定容到1L