磷酸盐缓冲盐水(PBS)是一种缓冲溶液,通常用于免疫组织化学(IHC)染色,并且经常用于生物学研究中。 PBS是一种水性盐溶液,包含磷酸氢钠,氯化钠,在某些情况下还包含氯化钾和磷酸二氢钾。
如何制作PBS缓冲液?
称重10.9g无水磷酸氢二钠(Na2HPO4),3.2g无水磷酸二氢钠(NaH2PO4)和90g氯化钠(NaCl)。溶于1L蒸馏水。
将pH调节至7.4,使溶液的终体积达到1L。
使用前将其稀释10倍,必要时重新调节pH值。
通过向1L溶液中加入5mL Tween 20,可以制成含0.5%Tween 20的PBS溶液。
制作PBS缓冲液的技巧
配制PBS溶液后,将缓冲液保存在室温下。
非无水试剂可以代替,但您必须重新计算每种试剂的适当质量,以容纳添加的水分子。
PBS缓冲液的用途:
磷酸盐缓冲盐水具有许多用途,因为它对大多数细胞均等渗且无毒。它可以用于稀释物质,通常用于冲洗细胞容器。 PBS可以在各种方法中用作稀释剂来干燥生物分子,因为其中的水分子将围绕物质(例如蛋白质)结构化。将其“干燥”并固定在固体表面上。
pH值保持稳定且一致,以防止细胞破坏。
与该物质结合的水薄膜可防止变性或其他构象变化。碳酸盐缓冲液可用于相同目的,但效果较差。
在椭圆偏光法中测量蛋白质吸附时,PBS也可用于获取参考光谱。