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马血清的使用方法及注意事项

发布时间:2022-07-18 点击量:27
   马血清采用健康的马血液为原料,封闭系统内无菌采血,微孔过滤而成。性状为浅黄色澄清液体,无细菌、真菌、支原体等,马血清比胎牛血清具有更高的蛋白质和更少的微量金属,在某些应用中可以作为胎牛血清的替代品,是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。
  使用方法:
  血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),置于2℃~8℃中使之融化,解冻过程中间歇地轻轻摇晃均匀,待全部溶解后再分装或直接使用。完全融解的血清从4℃拿出,按要求比例(5%-20%)加基础培养基配置成完全培养基,建议其置于4℃冰箱存放并于1-2周内用完。
  适用范围:
  1.10%的马血清能维持对绵羊红血球(SRBC)的抗体反应。
  2.马血清常与牛血清结合或单独使用,可以作为哺乳动物细胞培养的补充剂,已被用作嗜铬细胞瘤细胞和视网膜细胞等培养的补充剂。
  3.适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制、诊断试验、作为支原体生长和试验培养基的补充,以及用于培养造血干细胞和神经元细胞。
  注意事项:
  血清沉淀的物质主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,胎球蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。
  哪些原因容易导致血清沉淀:
  1.温度改变太大,血清由-20℃直接放入37℃解冻,因温度改变剧烈容易导致沉淀。
  2.血清在室温或4℃冰箱放置时间太久,血清中的不稳定成分会被破坏,影响细胞生长效果;导致血清品质变差,也会产生沉淀。
  3.血清分装冻存时,注意在不产生气泡的情况下摇晃均匀,避免因血清成分浓度改变产生沉淀。
  4.血清灭活后容易产生沉淀,如需使用灭活血清,请按56℃,30分钟,轻微摇晃原则操作,灭活温度过高、时间过长、摇晃不均都容易产生沉淀。
  5.如有血清沉淀,分装后进行离心处理,建议400g离心5分钟,取上清使用。